آنتی بادیهای اختصاصی بورلیا در CSF :

 به دو روش قابل سنجش می باشد:

I . الیزا بر روی نمونه CSF : این روش ساده و دارای تکرار پذیری بالا می باشد. میزان حساسیت و ویژگی روش بالا می باشد (حساسیت 95% در بیماران مبتلا به نوروبورلیوزیس و ویژگی بیش از 95% برای سایر بیماریهای نورولوژیک).

II . Anti- Borrelia EUROLINE-RN-AT (IgG)

این روش دارای ویژگی 100% و حساسیت بیش از 97% می باشد و همچنین طیف وسیعی از آنتی ژن ها را مورد سنجش قرار می دهد. مقادیر بسیار کم از نمونه CSF مورد نیاز است (250 میکرولیتر) و نتایج به وسیله نرم افزار EUROBlotMaster و EUROLineScan قابل آنالیز می باشد.

 

مارکر فعالیت و درمان بیماری:

سنجش آنتی ژن CXCL13 : EUROIMMUN CXCL13-ELISA :

این آنتی ژن مارکر مراحل اولیه نوروبورلیوزیس حاد می باشد. غلظت های بالای CXCL13 می تواند در شروع بیماری اندازه گیری شود حتی قبل از اینکه آنتی بادی علیه بورلیا قابل شناسایی باشد.

سنجش این آنتی ژن مارکری برای پیگیری بیماری است در واقع با درمان آنتی بیوتیکی موفق میزان CXCL13 به سرعت در CSF کاهش پیدا می کند.

 

تمایز بین فرم حاد و نوروبورلیوزیس سابق:

سطح پایین CXCL13 در CSF : نشان دهنده این است که نوروبورلیوزیس حاد بعید است.

سطح بالای CXCL13 در CSF : نشان دهنده این است که نوروبورلیوزیس حاد بسیار محتمل است.

 

ایمونوبلات بر روی CSF برای تشخیص نوروبورلیوزیس:

آنتی ژنهای مورد استفاده:

ترکیبی از آنتی ژنهای طبیعی تخلیص شده به وسیله روشهای الکتروفورتیک (p39, p41, p83 ) ، OspC طبیعی و VIsE نوترکیب برای B. afzelii ، B. garinii، B. burgdorferi ، آنتی ژنهای طراحی شده بصورت نوترکیب ( p18, p19, p20, p21, p58 ) و آنتی ژنهای جدید لیپیدی.

سنجش آنتی بادی IgG در سرم/CSF برای تشخیص اختصاصی تولید آنتی بادی در CSF	سنجش آنتی بادی IgG در سرم و پلاسما برای تایید نتایج مثبت و روی مرز
رقیق سازی نمونه
نمونه CSF به نسبت 1:4 با بافر رقت سرم به وسیله بافر عمومی اندازه گیری شده با CSQtotal  یا CSQlim	نمونه سرم یا پلاسما به نسبت 1:51  با بافر عمومی
زمان انکوباسیون
180 دقیقه/ 60 دقیقه/ 20 دقیقه در دمای اتاق	30 دقیقه/ 30 دقیقه/ 10 دقیقه در دمای اتاق
تفسیر نتایج
بسته به تعداد باندهای اختصاصی در سرم یا CSF nCSF > nserum : نشان دهنده تولید آنتی بادی اختصاصی پاتوژن در CNS nCSF < nserum : تفسیر بسته به شدت باندها (i) در CSF و سرم امکان پذیر است. iCSF < iserum : نشان دهنده آنتی بادی اختصاصی پاتوژن در CNS نمی باشد. iCSF  > iserum : نشان دهنده تولید آنتی بادی اختصاصی پاتوژن در CNS می باشد.	بسته به تعداد باندهای اختصاصی در سرم یا پلاسما n=0 منفی n=1 روی مرز استثنا: باند مثبت VIsE B.burgdorferi n>2 : مثبت

مزایای مهم:

• ویژگی (100%) و حساسیت (97%).

• رنج بالای آنتی ژنهای استفاده شده

• زمان انکوباسیون کوتاه

• نیاز به حجم کم نمونه CSF

• سنجش اتوماتیک نتایج آزمایشها با استفاده از EUROBlotMaster

• ارزیابی کامل نتایج با استفاده از EUROLineScan