روش ایمونوفلورسانس به دو روش انجام می شود
مستقیم وغیر مستقیم.
هر دو روش مستقیم (Direct immunofluorescense) و غیر مستقیم (Indirect immunofluorescense) برپایه اتصال اختصاصی آنتی ژن - آنتی بادی استوار است. در ایمونوفلورسانس مستقیم تنها از یک آنتی بادی که به مواد فلوروسنت متصل شده است، استفاده می گردد و در روش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم از دو آنتی بادی استفاده می شود که آنتی بادی ثانویه به مواد فلوروسنت اتصال یافته است.
در ایمونو فلورسانس مستقیم که بر روی بافت بیوپسی شده انجام میگردد، حصور کلاس های مختلف آنتی بادی مانند IgG ، IgM و IgA و نیز اجزای کمپلمان (مانند C3،C4) جستجو می گردند ولی در ایمونوفلورسانس غیرمستقیم نمونه سرم بیمار جهت بررسی حضور یا عدم حضور ( و هم چنین تیتراسیون) آنتی بادی ها و اتو آنتی بادی ها استفاده می گردد. درروش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم، سلولها یا بافت های گوناگون به عنوان آنتی ژن روی سطح اسلایدها پوشانده شده اند، سرم بیمار روی چاهک های ایجاد شده روی این اسلایدها اضافه شده و بعد از طی انکوباسیون لازم و شستشو، آنتی بادی ضد آنتی بادی انسانی نشاندار با مواد فلورسنت مانند FITC اضافه میشود. در کنار سرم بیمار روی هر اسلاید یک کنترل منفی و یک کنترل مثبت نیز قرار داده می شود. در صورت وجود این آنتی بادیدر سرم فرد به آنتی ژن موجود در اسلاید متصل شده و سپس این کمپلکس توسط آنتی بادی ثانویه کنژوگه با ماده فلوروسنت شناسایی شده که با میکروسکوپ فلوروسنت قابل مشاهده می باشد. با بررسی نمونه ها زیر میکروسکوپ فلورسنت و مقایسه الگوی فلورسنتی با الگوی حاصله از کنترل منفی وکنترل مثبت و الگو های موجود در منابع علمی تیتر و الگوی آنتی بادی هایی که بر علیه آنتی ژن تولید شده اند، مشخص می نمایند.
-
ایمونوفلورسنس غیرمستقیم (IIFA) روشی استاندارد در تشخیص بسیاری از اختلالات اتوایمیون بافت های مختلف می باشد.
-
تکنیک IMBT روش ارتقا یافته ای از ایمونوفلورسنس است که مزایایی نسبت به روش کلاسیک IIFA دارد.
-
در این روش، به جای استفاده از یک سوبسترا برای تشخیص یک اتوآنتی بادی منفرد (آن گونه که درروش کلاسیک IIFA انجام می شود)، همزمان از چندین سوبسترای گوناگون برای شناسایی چندین آنتی بادی مختلف، استفاده می شود.
از جمله مزایای روش IMBT نسبت به روش کلاسیک IIFA می توان به موارد زیر اشاره نمود:
-
تشخیص افتراقی بین بیماری های اتوایمیون با علایم بالینی یکسان
-
تشخیص سریع چندین آنتی بادی به طور همزمان
-
کاهش قابل ملاحظه هزینه تشخیص برای بیماران
آنتی بادی هایی را که می توان به صورت همزمان به روش IMBT شناسایی کرد، در زیر به صورت پانل های مجزا آورده شده است.
|
پانل تشخیصی |
ارزش کلینیکی |
|
Paraneoplastic-Neurologic Syndrome |
تشخیص سندروم های پارانئوپلاستیک- نورولوژیک |
|
Autoimmune Encephalitis |
تشخیص آنسفالیت های خودایمن |
|
Anti-Nuclear Antibodies |
تشخیص افتراقی اختلالات اتوایمیون سیستمیک و موضعی بافت همبند و بیماری های روماتوئید |
|
Autoimmune Myopathies |
تشخیص میوپاتی ها و درماتومیوزیت های خودایمن |
|
Autoimmune Liver Diseases |
شناسایی و افتراق بیماری های اتوایمیون کبد و مجاری صفراوی |
|
Digestive Tract Disorders |
تشخیص بیماری های خودایمن دستگاه گوارش |
|
Endocrinology Disorders |
تشخیص اختلالات اتوایمیون غدد درون ریز |
|
Dermatology |
تشخیص و افتراق بیماری های بلیسترینگ و اتوایمیون اپیدرم و درم |
|
Infectious Agents |
شناسایی عوامل بیماریزای عفونی در سرم و CSF برای تشخیص آنسفالیت و آرتریت عفونی |
|
Infertility Panel |
تشخیص علل اتوایمیون ناباروری و سقط مکرر |
تمامی پانل ها، به صورت هفتگی در آزمایشگاه تشخیص پزشکی اریترون انجام می شود.
